天博克羅地亞官網依托成熟的AI-CRISPR?細胞基因編輯平臺和完善的細胞培養體系,CRISPRi (基因抑制/沉默)系統是用于抑制內源性基因轉錄的強大工具,當dCas9(沒有切割活性的Cas9)被引導到靶基因的轉錄起始位點TSS(transcription start site)時,dCas9能夠物理性阻礙RNA聚合酶的通過,導致基因沉默。同時dCas9融合了一個基因抑制結構域,如KRAB結構域,這樣的蛋白稱之為dCas9-KRAB,可以進一步提高轉錄抑制的效率。此外,dCas9也可以融合雙抑制結構域KRAB-MeCP2,抑制效果更佳。
一、CRISPRi細胞定制服務
基因編輯細胞服務詳情,超300種細胞成功案例!
| 細胞類型 | 常規細胞系、腫瘤細胞系、IPS/ES等各類細胞 |
|---|---|
| 服務類型 | 單基因/多基因抑制 |
| 交付成果 | Cell Pool/單克隆 |
| 周期/價格 | 在線咨詢;添加官方微信號:18520176000(手機同號) |
二、CRISPRi技術原理
dCas9-KRAB CRISPRi系統是在DNA水平抑制基因表達,因此適用于多種類型的基因,包括:mRNA、非編碼RNA、microRNA、反義轉錄本、核定位RNA以及聚合酶III 轉錄本等基因的轉錄抑制。
三、服務流程及質量控制
優化實驗流程,有效提升編輯效率:基因/細胞分析→sgRNA設計→慢病毒包裝→藥物篩選→QPCR鑒定→擴增凍存。
四、AI-CRISPR?技術優勢
1. AI-CRISPR?技術優勢:AI-CRISPR?基因編輯輕松實現基因激活和抑制表達;擁有更高的基因切割效率,基因編輯效率提升10-20倍。
2. 成熟的技術平臺:大量成功案例,在超300種細胞中成功實現超數千例基因編輯;可提供從細胞基因表達調控、細胞功能驗證及表型分析的全流程服務。
3. 嚴格的質量控制體系:進行細菌、支原體等微生物的雙重檢測,確保100%無污染,并充分鑒定基因編輯效果;進行細胞活率檢測,保證交付質量。
五、CRISPRi vs ORF過表達
研究基因功能最常見的方法是,減少或者阻斷基因表達,然后進行表型分析。RNAi和CRISPRi都是常用的基因表達水平敲低的研究工具。
| 特點 | CRISPRi | RNAi |
|---|---|---|
| 靶向分子 | DNA轉錄起始位點 | mRNA |
| 作用位置 | 細胞核內 | 細胞質 |
| 脫靶效率 | 較低 | 高 |
| 起作用分子 | sgRNA+dCas9 | siRNA |