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基因抑制穩轉細胞系(CRISPRi)

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天博克羅地亞官網依托成熟的AI-CRISPR?細胞基因編輯平臺和完善的細胞培養體系,CRISPRi (基因抑制/沉默)系統是用于抑制內源性基因轉錄的強大工具,當dCas9(沒有切割活性的Cas9)被引導到靶基因的轉錄起始位點TSS(transcription start site)時,dCas9能夠物理性阻礙RNA聚合酶的通過,導致基因沉默。同時dCas9融合了一個基因抑制結構域,如KRAB結構域,這樣的蛋白稱之為dCas9-KRAB,可以進一步提高轉錄抑制的效率。此外,dCas9也可以融合雙抑制結構域KRAB-MeCP2,抑制效果更佳。


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一、CRISPRi細胞定制服務

基因編輯細胞服務詳情,超300種細胞成功案例!

細胞類型 常規細胞系、腫瘤細胞系、IPS/ES等各類細胞
服務類型 單基因/多基因抑制
交付成果 Cell Pool/單克隆
周期/價格 在線咨詢;添加官方微信號:18520176000(手機同號)

二、CRISPRi技術原理

dCas9-KRAB CRISPRi系統是在DNA水平抑制基因表達,因此適用于多種類型的基因,包括:mRNA、非編碼RNA、microRNA、反義轉錄本、核定位RNA以及聚合酶III 轉錄本等基因的轉錄抑制。

 

三、服務流程及質量控制

優化實驗流程,有效提升編輯效率:基因/細胞分析→sgRNA設計→慢病毒包裝→藥物篩選→QPCR鑒定→擴增凍存。

 

四、AI-CRISPR?技術優勢

1. AI-CRISPR?技術優勢:AI-CRISPR?基因編輯輕松實現基因激活和抑制表達;擁有更高的基因切割效率,基因編輯效率提升10-20倍。

2. 成熟的技術平臺:大量成功案例,在超300種細胞中成功實現超數千例基因編輯;可提供從細胞基因表達調控、細胞功能驗證及表型分析的全流程服務。

3. 嚴格的質量控制體系:進行細菌、支原體等微生物的雙重檢測,確保100%無污染,并充分鑒定基因編輯效果;進行細胞活率檢測,保證交付質量。

五、CRISPRi vs ORF過表達

研究基因功能最常見的方法是,減少或者阻斷基因表達,然后進行表型分析。RNAi和CRISPRi都是常用的基因表達水平敲低的研究工具。

特點 CRISPRi RNAi
靶向分子 DNA轉錄起始位點 mRNA
作用位置 細胞核內 細胞質
脫靶效率 較低
起作用分子 sgRNA+dCas9 siRNA
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